MR-VP

Il Metil Red Voges Proskauer Medium (MR-VP) è un terreno differenziale sviluppato da Clark e Lubs utilizzato per differenziare gli enterobatteri. Il MR-VP contiene 3 sostanze fondamentali per la crescita degli organismi batterici quali peptone, glucosio e K2HPO4. I batteri MR positivi (come l’Escherichia coli) hanno la capacità di fermentare il glucosio con produzione di acido lattico, acido succinico, acido acetico e acido formico; Questi prodotti metabolici, hanno la particolarità di restare stabili durante l'incubazione e produrre così un alto tasso di ioni idrogeno. I batteri MR negativi (come gli Enterobacter aerogenes) hanno la capacità di produrre acido lattico, acido acetico e acido formico; questi prodotti metabolici, hanno la particolarità di non restare stabili durante l'incubazione e produrre così un basso tasso di ioni Idrogeno, essi vengono trasformati in carbonati e anidride carbonica. L'acido acetico, a pH 6,3 viene convertito in acetoina o in 2-3 butilenglicol. A volte si ottiene un'inversione alcalina del terreno a causa delle proteine che effettuano un attacco catabolico con produzione di composti ammoniacali. Si possono differenziare i 2 risultati, tramite l'aggiunte dell'indicatore rosso fenolo, che si colora a seconda dell'acidità delle sostanze prodotte (rosso o giallo). Nella prova VP, si differenziano i microrganismi che fermentano il glucosio con produzione di sostanze acidi o con produzione di acetoina (metilacetilcarbonolo). L'acetoina, presente nella colture, è ossidato a diacetile dall'ossigeno atmosferico, in un ambiente reso alcalino all'aggiunta del secondo reagente: KOH 0,2mL (idrossido di potassio). Il diacetile, reagisce con il primo reagente aggiunto: l'a-naftolo 0,5mL e si produrrà una colorazione rossa per le reazioni positive e marrone per le reazioni negative. I reattivi devono essere severamente aggiunti nell'ordine seguente, prima a-naftolo solubilizzato in alcol etilico a freddo, poi la base solubilizzata in acqua fredda.


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